南京大部分地区通行南京官话，高淳区大部、溧水区南部地区的方言则通行吴语。

南京有道教、天主教、基督教、佛教、伊斯兰教五大宗教。南京道教历史悠久，在中国道教史上占有重要地位，历代高道辈出

南京的饮食以金陵菜著名，金陵菜是指以南京为中心，一直延伸到江西九江的菜系，是苏菜的四大代表菜之一。

南京当地主要的民俗活动有元宵灯会、清明踏青、端午节游秦淮、中秋圆月摸秋、重阳登高会、腊八节品粥、小年迎财神等。

南京是中国绘画、书法的重镇。在六朝时有王羲之、顾恺之等书画大家。

南京的地方曲艺有南京白局、南京白话、南京评话、高淳阳腔目连戏、洪山戏等。

《茉莉花》是南京著名的民歌，源自于南京六合民间传唱百年的《鲜花调》，由著名军旅作曲家何仿采自于六合的民歌汇编整理而成。

南京的工艺品种类繁多，最为著名的有南京云锦、金陵金箔、雕花天鹅绒、南京仿古牙雕、金陵折扇、南京木雕、南京剪纸、金陵竹刻等。